3ème année
Validation intralaboratoire des méthodes d'analyses
Definition
I. Pourquoi valider une méthode ?
La validation d'une procédure est de démontrer qu'elle est appropriée à l'usage auquel elle est destinée.
Le cycle d'une méthode d'analyse : on a un problème analytique
Donc Sélection (choix des analytes, type de méthode) => Développement (réglage de l'instrument) => Validation intralaboratoire => Validation interlaboratoire => Utilisation en routine
II. Les critères de validation intralaboratoire
• Sélectivité, Spécificité
Permet absence d'interférence entre l'analyte et les composés de la matrice. Spécificité et Sélectivité dépendent de la matrice, de la méthode utilisée. Les résultats d'analyses sont IDENTIQUES en présence d'ajouts de substances interférentes potentielles. On fait des études d'échantillons "stressés". On va également ici faire l'analyse de la pureté des pics en chromatographie.
• Linéarité
Linéarité de la fonction réponse et linéarité de la fonction de la méthode.
utilisation linéarité dans dosage de la teneur en principe actif et impureté.
Définition linéarité = est sa capacité à donner des résultats qui sont directement (à l’intérieur de certaines limites) proportionnels à la concentration (quantité) de la substance analysée dans un échantillon
• Justesse = Erreur systématique
La justesse est évaluée pour le dosage de la teneur en principe actif et impuretés sur l'ensemble du domaine d'utilisation. Il faut au moins 9 résultats (3 concentrations avec 3 échantillons chacune)
• Fidélité = Incertitude
On a 4 niveaux de fidélité => (Fidélité instrumentale/ Répétabilité/ Fidélité intermédiaire / Reproductibilité)
> Fidélité instrumentale / Variabilité mise en évidence = la détection, l'injection, l'intégration, la séparation ou la variation du débit
> Répétabilité / au niveau de la préparation de l'échantillon / variabilité qui est mis en évidence = celle la dérivation, de dilution, extraction, pesée
> Fidélité intermédiaire / intralaboratoire, temps court terme / variabilité qui est mis en évidence = celle de l'appareillage, des réactifs, des étalons ...
> Reproductibilité / temps long terme / essais interlaboratoires / Variabilité qui est mis en évidence = celle des étalons, des opérateurs, des réactifs ...
• Limite ou seuil de détection LD
• Limite ou seuil de dosage LQ
Pour comprendre LD et LQ : ce sont des sensibilités DEF = sensibilité quotient de la variation d’une indication d’un système de mesure
par la variation correspondante de la valeur de la grandeur mesurée
• Domaine d’utilisation
=> Schema justesse et fidélité si juste + fidèle = résultat exact
définition : est l’intervalle entre la concentration la plus élevée et la concentration la plus faible (quantités) de la substance analysée dont on a démontré qu’elles pouvaient être déterminées avec un degré acceptable de fidélité, de justesse et de linéarité.
• Robustesse
3ème année
Validation intralaboratoire des méthodes d'analyses
Definition
I. Pourquoi valider une méthode ?
La validation d'une procédure est de démontrer qu'elle est appropriée à l'usage auquel elle est destinée.
Le cycle d'une méthode d'analyse : on a un problème analytique
Donc Sélection (choix des analytes, type de méthode) => Développement (réglage de l'instrument) => Validation intralaboratoire => Validation interlaboratoire => Utilisation en routine
II. Les critères de validation intralaboratoire
• Sélectivité, Spécificité
Permet absence d'interférence entre l'analyte et les composés de la matrice. Spécificité et Sélectivité dépendent de la matrice, de la méthode utilisée. Les résultats d'analyses sont IDENTIQUES en présence d'ajouts de substances interférentes potentielles. On fait des études d'échantillons "stressés". On va également ici faire l'analyse de la pureté des pics en chromatographie.
• Linéarité
Linéarité de la fonction réponse et linéarité de la fonction de la méthode.
utilisation linéarité dans dosage de la teneur en principe actif et impureté.
Définition linéarité = est sa capacité à donner des résultats qui sont directement (à l’intérieur de certaines limites) proportionnels à la concentration (quantité) de la substance analysée dans un échantillon
• Justesse = Erreur systématique
La justesse est évaluée pour le dosage de la teneur en principe actif et impuretés sur l'ensemble du domaine d'utilisation. Il faut au moins 9 résultats (3 concentrations avec 3 échantillons chacune)
• Fidélité = Incertitude
On a 4 niveaux de fidélité => (Fidélité instrumentale/ Répétabilité/ Fidélité intermédiaire / Reproductibilité)
> Fidélité instrumentale / Variabilité mise en évidence = la détection, l'injection, l'intégration, la séparation ou la variation du débit
> Répétabilité / au niveau de la préparation de l'échantillon / variabilité qui est mis en évidence = celle la dérivation, de dilution, extraction, pesée
> Fidélité intermédiaire / intralaboratoire, temps court terme / variabilité qui est mis en évidence = celle de l'appareillage, des réactifs, des étalons ...
> Reproductibilité / temps long terme / essais interlaboratoires / Variabilité qui est mis en évidence = celle des étalons, des opérateurs, des réactifs ...
• Limite ou seuil de détection LD
• Limite ou seuil de dosage LQ
Pour comprendre LD et LQ : ce sont des sensibilités DEF = sensibilité quotient de la variation d’une indication d’un système de mesure
par la variation correspondante de la valeur de la grandeur mesurée
• Domaine d’utilisation
=> Schema justesse et fidélité si juste + fidèle = résultat exact
définition : est l’intervalle entre la concentration la plus élevée et la concentration la plus faible (quantités) de la substance analysée dont on a démontré qu’elles pouvaient être déterminées avec un degré acceptable de fidélité, de justesse et de linéarité.
• Robustesse