Définition
Aseptie
Ensemble de mesures visant à prévenir toute contamination par des micro-organismes.
Culture cellulaire
Technique de laboratoire utilisée pour la croissance, le maintien et la manipulation de cellules.
Cellule eucaryote
Cellule qui possède un noyau entouré d'une membrane ainsi que d'autres organites spécialisés.
Principes de l'aseptie en culture cellulaire
L'aseptie est fondamentale en culture cellulaire afin de maintenir les cultures exemptes de tout type de contamination. Les principaux contaminants incluent les bactéries, les champignons, les mycoplasmes et autres pathogènes qui peuvent altérer les résultats expérimentaux. L'aseptie repose sur deux principes majeurs : éviter l'introduction de contaminants et éliminer les contaminants présents.
Techniques de base pour maintenir l'aseptie
Utilisation de matériel stérile
Tout matériel utilisé en culture cellulaire doit être stérile afin d’éviter toute introduction de contaminants. Cela inclut le matériel en verre, les pipettes, les milieux de culture, et les instruments de manipulation. La stérilisation peut être réalisée par autoclave, filtration ou irradiation.
Précautions lors de la manipulation
Les manipulations doivent être effectuées sous des conditions stériles, généralement dans des hottes à flux laminaire qui empêchent l'entrée des contaminants. Les praticiens doivent porter des équipements de protection comme des gants, des blouses, et parfois des masques. Il est également crucial de désinfecter les mains et le matériel fréquemment avec de l'alcool ou d'autres désinfectants adéquats.
Suivi et contrôle de la contamination
Pour garantir l'aseptie, un contrôle régulier des cultures est indispensable pour détecter toute contamination. Cela inclut l'observation microscopique régulière et l'utilisation de techniques de détection spécifiques, comme les tests de mycoplasmes ou les cultures bactériennes.
Sources potentielles de contamination
Environnement de laboratoire
Les contaminants peuvent provenir de l'air ambiant, des surfaces de travail non désinfectées, et du personnel du laboratoire. C'est pourquoi il est crucial d'avoir une infrastructure de laboratoire adéquate et de maintenir les zones de travail très propres.
Instruments et réactifs
Des instruments non stériles ou des réactifs contaminés sont également des sources de risque importants. Il est donc nécessaire de vérifier la qualité et la stérilité des réactifs régulièrement et d'utiliser du matériel à usage unique lorsque possible.
Bilan et recommandations
A retenir :
L'aseptie en culture cellulaire eucaryote repose sur des principes stricts visant à prévenir et contrôler les contaminations. L'utilisation de matériel stérile, des précautions de manipulation rigoureuses, et un suivi constant des signes de contamination sont essentiels pour garantir l'intégrité des cultures. Il est également impératif de reconnaître les sources potentielles de contamination pour les gérer efficacement. Le maintien d'un environnement de travail stérile et sécurisé permet de préserver les résultats expérimentaux et de garantir la fiabilité des études en cours.
