Partielo | Culture cellulaire

Définition

Culture cellulaire

Etude + utilisation cellules conservées / développées ex vivo.

Culture pirmaire

Culture cellules, tissus, organes pris d'un organisme.

Culture secondaire

Culture obtenue par repiquage -> à partir d'1 culture primaire.

Repiquage

Transfert cellules d'1 flacon de culture -> a plusieurs autres.

Lignée cellulaire

Population homogène cellules, stables, après MITOSES successives (repiquages successifs) -> lignée continue = durée vie illimitée.

Souche cellulaire

Dérivée culture primaire/lignée cellulaire par sélection ou clonage cellules, avec propriétés spécifiques.

Confluence

Occupation toute surface boîte de culture par cellules -> arrêt prolifération par inhibition contact.

Cycle cellulaire

Vie d'1 cellule (division cellule mère),depuis sa formation -> fin division en 2 cellules filles.

Différentiation cellulaire

Activation certains gènes + répression d'autres.

Applications CC

-Biologie cellulaire 	- Clonage 			-Thérapie régénératrice					-Biopharmacie 				-Immunologie 			-IAA

Mitose (phase M)

Distribue à part égale, ADN entre deux cellule filles. (noyau)

Interphase

Période : fin division -> début nvlle.

Cellule souches

Embryon -> peu différenciées = renouvellement facile + permet différenciation.

Cellules différenciées

Hépatocyte = hautement différencié.
Neurone = fonctions spécifiques.
Fibroblaste = peu protéines spécifiques.

Cellules libres

Techniques prélèvement + centrifugation Ficoll

Cellules en Cohésion

-> formation tissus. (protéine membranaire + composants matrice extracellulaire).

Méthodes dissection :

Culture explants : migration cellules à partir fragments -> MULTIPLICATION.

Méthodes enzymatiques (protéolytiques):

Séparation cellules -> TRYPSINE.

Caractéristiques cultures Primaires + Secondaires

Provient tissus normaux (humain/animale)
Cellules séparés par Trypsine + se fixent sur paroi (1 couche cellulaire).
Confluence = Inhibition contact.

Cinétique prolifération cellulaire

1 = pas dv cell. 2 = Phase dv + temps doublement. 3 = épuisement milieu, arrêt prolifération. 5 = repiquage/mort cell.

Méthodes culture stationnaire

Affinité cellules pour support solide -> adhérer surface + développement cell.

Changement milieu (milieu nutritif).
Repiquage : (confluence).

Méthodes cultures suspension

Culture en "masse" -> virologie + biotechnologie. (Appareil agitation = cytoculteurs)

Numération + viabilité

Numération = Cellules MALASSEZ.

Colorants exclusion = bleu Trypan (cellules mortes)

Besoins nutritionnels

Eau.
Constituants Minéraux.
Source carbone -> D glucose.
Acides aminés -> Glutamine.
Hormones.
Acides nucléiques.
Substance lipidiques.
AG.
Sérums veau fœtal.

Paramètres physico-chimiques

-pH (7.2-7.4). -Température (37°C). - Pression osmotique. -Hygrométrie (85%). -CO2 (maintien pH).

Milieux + réactifs

Tampon : HEPES (solution lavage).
Milieux culture : Eagle + glutamine (1mL) + sérum veau foetal (10mL) + antibiotique (1mL)
Solution Trypsine : EDTA.