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Chapitre 1 : Séparation des protéines (I)

Post-Bac
5

Chapitre 1 : Séparation des protéines (I)

Biochimie

I. Chromatographie Liquide

1) SEC Size exclusion Chromatography


Séparation des protéines selon leur différence de taille (hydrodynamic radius). Séparation repose sur la capacité d'une protéine à pénétrer dans les pores d'une phase stationnaire (phase stat. à sélectionner selon gamme de fractionnation). (Il n'y a AUCUNE interaction chimique, donc PAS de gradient nécessaire).


utilisation de SEC : séparation protéine selon taille + pour estimer masse protéine + éliminer les sels (desalting avant une MS : évite les faux résultats avec d'autres ions qui s'affichent, protéine est éluée dans volume d'exclusion et les sels sortent + tard) + pour échanger de solvant avec un autre


2) IEC Ion Exchange Chromatography


Séparation des protéines selon leur différence de charge nette, grâce à une phase stationnaire chargée +/- , on aura des interactions électrostatiques avec les protéines.

Le

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